Po mechanické lýze buněčné suspenze existuje mnoho buněčných fragmentů.Jak tyto fragmenty odstranit?Podívejme se na různé přístupy:

1. Použijte metodu ředění.Když jsou buňky zředěné, mohou se také množit, budou stále početnější a buněčných zbytků bude odpovídajícím způsobem méně a méně.
2. Je zde i přirozené osídlení.Buňky se usazují rychleji než většina fragmentů: : Přesuňte buněčnou suspenzi docentrifugační zkumavkaa když většina buněk klesne, může být horní roztok odsát a poté přidán do kultivačního roztoku, aby se buňky suspendovaly.Tuto metodu lze použít opakovaně, přičemž pokaždé můžete pod mikroskopem pozorovat, zda vyhovuje vašim požadavkům.
3. Nízkorychlostní odstředivkadokáže odstranit nečistoty, obecně 700 g, 5 minut
4. Při odstřeďováníza podmínky, že počet buněk je dostatečný, zkraťte dobu odstřeďování, např. 5 minut, 1000 ot./min, místo 3 minut, 1000 ot./min. a odstraňte supernatant, protože nekróza a zbytky jsou obecně v supernatantu!Tuto operaci je třeba provést pouze jednou během procesu mytí před inkubací!

Přestože existuje mnoho způsobů, jak odstranit zbytky buněk, zjistíte, že centrifugace je jednou z nejúčinnějších metod！

A protože rostlinná pletiva a buňky mají buněčné stěny složené z celulózy, hemicelulózy a pektinu, je obecně nutné k dosažení účelu rozemlít křemenný písek nebo skleněný prášek s vhodným extrakčním roztokem nebo ošetřit celulázou.Fragmentace bakteriálních buněk je obtížnější, protože celý skelet bakteriální buněčné stěny je vlastně kovalentní vazbou peptidoglykanových cystických makromolekul, velmi houževnatých.Mezi běžné metody rozbíjení bakteriálních buněčných stěn patří ultrazvukové drcení, pískové mletí, vysokotlaká extruze nebo ošetření lysozymem.Po rozbití tkáně a buněk se vybere vhodný pufr pro extrakci požadovaného proteinu.Nerozpustné materiály, jako jsou buněčné fragmenty, jsou odstraněnyodstředivkanebo filtrace.

kontaktujte prosím Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709